书 书 书犐犆犛 ６７ ． ０４０ 犆 ５３ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ５００９ ． ４９ — ２００８ 代替 ＧＢ ／ Ｔ５００９．４９ — ２００３ 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法 犕犲狋犺狅犱犳狅狉犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳犺狔犵犻犲狀犻犮狊狋犪狀犱犪狉犱 狅犳犳犲狉犿犲狀狋犲犱犪犾犮狅犺狅犾犻犮犫犲狏犲狉犪犵犲狊犪狀犱狋犺犲犻狉犻狀狋犲犵狉犪狋犲犱犪犾犮狅犺狅犾犻犮犫犲狏犲狉犪犵犲狊 ２００８  １１  ２１ 发布 ２００９  ０３  ０１ 实施 中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准代替 ＧＢ ／ Ｔ５００９．４９ — ２００３ 《 发酵酒卫生标准的分析方法 》。 本标准与 ＧＢ ／ Ｔ５００９．４９ — ２００３ 相比主要修改如下 ： ——— 修改了标准的名称 ； ——— 修改了标准方法的名称 ； ——— 增加了总二氧化硫的测定方法 ； ——— 删除了黄曲霉毒素 Ｂ １ 的测定 ； ——— 删除了 犖  亚硝胺类 （ 啤酒 ） 的测定 ； ——— 删除了着色剂的测定 。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口 。 本标准由中华人民共和国卫生部负责解释 。 本标准起草单位 ： 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所 、 中国食品发酵工业研究院 、 辽宁省疾 病预防控制中心 、 黑龙江省疾病预防控制中心 、 重庆市疾病预防控制中心 。 本标准主要起草人 ： 杨大进 、 常迪 、 赵馨 、 康永璞 、 李敏 、 肖白曼 、 赵舰 。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 ： ——— ＧＢ５００９．４９ — １９８５ 、 ＧＢ ／ Ｔ５００９．４９ — １９９６ 、 ＧＢ ／ Ｔ５００９．４９ — ２００３ 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ５００９ ． ４９ — ２００８ 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法 １ 　 范围 本标准规定了发酵酒及其配制酒中各项卫生指标的分析方法 。 本标准适用于发酵酒及其配制酒中各项卫生指标的分析 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１ — ２００３ 　 食品卫生检验方法 　 理化部分 　 总则 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１２ 　 食品中铅的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．３４ — ２００３ 　 食品中亚硫酸盐的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１８５ 　 苹果和山楂制品中展青霉素的测定 ３ 　 感官检查 应符合相应产品标准的有关规定 。 ４ 　 理化检验 ４ ． １ 　 总二氧化硫 ４ ． １ ． １ 　 氧化法 ４ ． １ ． １ ． １ 　 原理 在低温条件下 ， 样品中的游离二氧化硫与过量的过氧化氢反应生成硫酸 ， 再用碱标准溶液滴定生成 的硫酸 ， 由此可得到样品中游离二氧化硫的含量 。 在加热条件下 ， 样品中的结合二氧化硫被释放 ， 与过 氧化氢发生氧化还原反应 ， 通过用氢氧化钠标准溶液滴定生成的硫酸 ， 可得到样品中结合二氧化硫的含 量 。 将结合二氧化硫与游离二氧化硫测定值相加 ， 即得出样品中总二氧化硫的含量 。 ４ ． １ ． １ ． ２ 　 试剂 ４ ． １ ． １ ． ２ ． １ 　 过氧化氢 （ Ｈ ２ Ｏ ２ ）： 分析纯 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ２ 　 磷酸 （ Ｈ ３ ＰＯ ４ ）： 分析纯 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ３ 　 氢氧化钠 （ ＮａＯＨ ）： 分析纯 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ４ 　 甲基红 （ Ｃ １５ Ｈ １５ Ｎ ３ Ｏ ２ ）： 指示剂 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ５ 　 次甲基蓝 （ Ｃ １６ Ｈ １８ ＣＩＮ ３ Ｓ · ３Ｈ ２ Ｏ ）： 指示剂 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ６ 　 过氧化氢溶液 （ ０．３％ ）： 吸取 １ｍＬ３０％ 过氧化氢 （ 开启后存于冰箱 ）， 用水稀释至 １００ｍＬ 。 使用当天配制 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ７ 　 磷酸溶液 （ ２５％ ）： 量取 ２９５ｍＬ８５％ 磷酸 ， 用水稀释至 １０００ｍＬ 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ８ 　 氢氧化钠标准滴定溶液 ［ 犮 （ ＮａＯＨ ） ＝０．０１ｍｏｌ ／ Ｌ ］： 按 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１ — ２００３ 的附录 Ｂ 配制 与标定 。 存放在橡胶塞上装有钠石灰管的瓶中 ， 每周重配 。 ４ ． １ ． １ ． ２ ． ９ 　 甲基红  次甲基蓝混合指示液 ： 溶液 Ⅰ ： 称取 ０．１ｇ 次甲基蓝 ， 溶于乙醇 （ ９５％ ）， 用乙醇 （ ９５％ ） 稀释至 １００ｍＬ 。 溶液 Ⅱ ： 称取 ０．１ｇ 甲基红 ， 溶于乙醇 （ ９５％ ）， 用乙醇 （ ９５％ ） 稀释至 １００ｍＬ 。 １ 犌犅 ／ 犜 ５００９ ． ４９ — ２００８ 取 ５０ｍＬ 溶液 Ⅰ 、 １００ｍＬ 溶液 Ⅱ ， 混匀 。 ４ ． １ ． １ ． ３ 　 仪器 ４ ． １ ． １ ． ３ ． １ 　 二氧化硫测定装置 ， 见图 １ 。 Ａ ——— 短颈球瓶 ； Ｂ ——— 三通连接管 ； Ｃ ——— 通气管 ； Ｄ ——— 直管冷凝管 ； Ｅ ——— 弯管 ； Ｆ ——— 真空蒸馏接受管 ； Ｇ ——— 梨形瓶 ； Ｈ ——— 气体洗涤器 ； Ｉ ——— 直角弯管 （ 接真空泵或抽气管 ）。 图 １ 　 二氧化硫测定装置 ４ ． １ ． １ ． ３ ． ２ 　 真空泵 。 ４ ． １ ． １ ． ４ 　 分析步骤 ４ ． １ ． １ ． ４ ． １ 　 游离二氧化硫的测定 ４ ． １ ． １ ． ４ ． １ ． １ 　 按图 １ 所示 ， 将二氧化硫测定装置连接妥当 ， Ｉ 管与真空泵 （ 或抽气管 ） 相接 ， Ｄ 管通入冷 却水 。 取下梨形瓶 （ Ｇ ） 和气体洗涤器 （ Ｈ ）， 在 Ｇ 瓶中加入 ２０ｍＬ 过氧化氢溶液 、 Ｈ 管中加入 ５ｍＬ 过氧 化氢溶液 ， 各加 ３ 滴混合指示液后 ， 溶液立即变为紫色 ， 滴入氢氧化钠标准溶液 ， 使其颜色恰好变为橄榄 绿色 ， 然后重新安装妥当 ， 将 Ａ 瓶浸入冰浴中 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． １ ． ２ 　 吸取 ２０．００ｍＬ 样品 （ 液温 ２０℃±０．１℃ ）， 从 Ｃ 管上口加入 Ａ 瓶中 ， 随后吸取 １０ｍＬ 磷 酸溶液 （ ４．１．１．２．７ ）， 亦从 Ｃ 管上口加入 Ａ 瓶中 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． １ ． ３ 　 开启真空泵 ， 使抽入空气流量 １０００ｍＬ ／ ｍｉｎ ～ １５００ｍＬ ／ ｍｉｎ ， 抽气 １０ｍｉｎ 。 取下 Ｇ 瓶 ， 用氢氧化钠标准滴定溶液 （ ４．１．１．２．８ ） 滴定至重现橄榄绿色即为终点 ， 记下消耗的氢氧化钠标准滴定溶 液的毫升数 。 以水代替样品做空白试验 ， 操作同上 。 一般情况下 ， Ｈ 管中溶液不应变色 ， 如果溶液变为 紫色 ， 也需用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至橄榄绿色 ， 并将所消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积与 Ｇ 瓶消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积相加 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ５００９ ． ４９ — ２００８ ４ ． １ ． １ ． ４ ． １ ． ４ 　 结果计算 样品中游离二氧化硫的含量按式 （ １ ） 计算 。 犡 ＝ 犮 × （ 犞 － 犞 ０ ） × ３２ ２０ × １０００ ……………………………（ １ ） 　　 式中 ： 犡 ——— 样品中游离二氧化硫的含量 ， 单位为毫克每升 （ ｍｇ ／ Ｌ ）； 犮 ——— 氢氧化钠标准滴定溶液的浓度 ， 单位为摩尔每升 （ ｍｏｌ ／ Ｌ ）； 犞 ——— 测定样品时消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）； 犞 ０ ——— 空白试验消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）； ３２ ——— 二氧化硫的摩尔质量的数值 ， 单位为克每摩尔 （ ｇ ／ ｍｏｌ ）； ２０ ——— 吸取样品的体积 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）。 计算结果保留三位有效数字 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． １ ． ５ 　 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 １０％ 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． ２ 　 结合二氧化硫的测定 ４ ． １ ． １ ． ４ ． ２ ． １ 　 继 ４．１．１．４．１ 测定游离二氧化硫后 ， 将滴定至橄榄绿色的 Ｇ 瓶重新与 Ｆ 管连接 。 拆除 Ａ 瓶下的冰浴 ， 用温火小心加热 Ａ 瓶 ， 使瓶内溶液保持微沸 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． ２ ． ２ 　 开启真空泵 ， 以下操作同 ４．１．１．４．１．３ 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． ２ ． ３ 　 计算 同 ４．１．１．４．１．４ 。 计算结果为结合二氧化硫含量 。 ４ ． １ ． １ ． ４ ． ３ 　 结果计算 将游离二氧化硫与结合二氧化硫的测定值相加 ， 即为样品中总二氧化硫含量 。 ４ ． １ ． ２ 　 直接碘量法 ４ ． １ ． ２ ． １ 　 原理 在碱性条件下 ， 结合态二氧化硫被解离出来 ， 然后再用碘标准滴定溶液滴定 ， 得到样品中总二氧化 硫的含量 。 ４ ． １ ． ２ ． ２ 　 试剂 ４