中华人民共和国国家标准 GB 5009.205 —2013 2013-11-29发布 2014-06-01实施 食品安全国家标准 食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定 GB 5009.205—2013 I 前 言 本标准代替 GB/T 5009.205 —2007《食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定》 。 本标准与 GB/T 5009.205 —2007相比，主要变化如下： ——增加了加速溶剂萃取（ ASE）方法； ——增加了 WHO于2005年修订后的 多氯代二苯并二噁英及呋喃和二噁英样多氯联苯毒性当量因 子。 GB 5009.205 —2013 1 食品安全国家标准 食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定 1 范围 本标准规定了食品中 17种2,3,7,8 -取代的多氯代二苯并二噁英 （ PCDDs） 、 多氯代二苯并呋喃 （ PCDFs） 和12种二噁英样多氯联苯（ DL-PCBs）含量及二噁英毒性当量（ TEQ）的测定方法。 本标准适用于附录 A的表A.1中规定的食品中 17种2,3,7,8 -取代多氯代二苯并二噁英及多氯代二苯并 呋喃（ PCDD/Fs ）和 12种DL-PCBs含量及其 TEQ的测定。 2 原理 应用高分辨气相色谱－高分辨质谱联用技术，在质谱分辨率大于 10 000的条件下，通过精确质量测 量监测目标化合物的两个离子，获得目标化合物的特异性响应。以目标化合物的同位素标记化合物为定 量内标，采用稳定性同位素稀释法准确测定食品中 2,3,7,8位氯取代的 PCDD/Fs 和DL-PCBs的含量；并以 各目标化合物的毒性当量因子 (TEF)与所测得的含量相乘后累加，得到样品中二噁英及其类似物的毒性 当量（ TEQ）。 3 试剂和材料 3.1 有机溶剂 注：以下有机溶剂均为农残级，浓缩 10 000倍后不得检出二噁英及其类似物。 3.1.1 丙酮（C3H6O）。 3.1.2 正己烷（C6H14）。 3.1.3 甲苯（C7H8）。 3.1.4 环己烷（C6H12）。 3.1.5 二氯甲烷 （CH 2Cl2）。 3.1.6 乙醚（C4H10O）。 3.1.7 甲醇（CH 3OH）。 3.1.8 正壬烷（C9H20）。 3.1.9 异辛烷（C8H18）。 3.1.10 乙酸乙酯（ CH 3COOCH 2CH 3）。 3.1.11 乙醇（ CH 3CH 2OH）。 3.2 标准溶液 3.2.1 PCDD/Fs标准溶液 注：本标准推荐使用 EPA1613 -1997规定的标准溶液，各实验室可根据具体情况选用相当的标准品 。如果需要制备储 备溶液，应该在通风橱中进行，并且戴上防毒面罩。 GB 5009.205 —2013 2 3.2.1.1 校正和时间窗口确定的标准溶液（ CS3WT溶液）：用壬烷配制，为含有天然和同位素标 记 PCDD/Fs （定量内标、净化标准和回收率内标）的溶液，用于方法的校正和确证，并可以用于 DB5 MS 毛细管柱 (或等效柱 )时间窗口确定和 2,3,7,8 -TCDD分离度的检查（见附录 B的表B.1）。 3.2.1.2 净化标准溶液：用壬烷配制的37Cl4-2,3,7,8 -TCDD溶液（浓度为 40 μg/L ± 2 μg/L）。 3.2.1.3 同位素标记定量内标的储备溶液 ：用壬烷配制的13C12-PCDD/Fs 溶液（见附录 B的表B.2）。 3.2.1.4 回收率内标标准溶液 ：用壬烷配制的13C12-1,2,3,4-TCDD和13C12-1,2,3,7,8,9 -HxCDD溶液（见附 录B的表B.3）。 3.2.1.5 精密度和回收率检查标准溶液（ PAR）：用壬烷配制的含天然 PCDD/Fs 溶液（见附录 B的表 B.4），用于方法建立时的初始精密度和回收率试验（ IPR）及过程精密度和回收率试验（ OPR）。 3.2.1.6 保留时间窗口确定的标准溶液 (TDTFWD) ：用于确定规定毛细管柱中四氯至 八氯取代化合物 出峰顺序，同时用于检查在规定的色谱柱中 2,3,7,8 -TCDD和2,3,7,8 -TCDF的分离度（见附录 B的表B.6）。 3.2.1.7 校正标准溶液：为含有天然和同位素标记的 PCDD/Fs 系列校正溶液（见附录 B的表B.7），其 中CSL为浓度更低的天然 PCDD/Fs 校正溶液，用于质谱系统校正。测定校正标准溶液，可以获得天然与 标记 PCDD/Fs 的相对响应因子（ RRF）。此外， CS3用于已建立 RRF的日常校正和校正曲线校验 (VER)； CS1用于检查 HRGC -HRMS必须具备的灵敏度。由于食品要求的灵敏度更低，可以使用 CSL进行灵敏度 检查。 3.2.2 DL-PCBs标准溶液 注：本标准推荐使用 EPA1668A 规定的标准溶液，各实验室可根据具体情况选用相当的标准品。 如果需要制备储备 溶液，应该在通风橱中进行，并且戴上防毒面罩。 3.2.2.1 时间窗口确定和定量内标标准溶液：用壬烷配制的含同位素标记 DL-PCBs的溶液（见附录 B 的表B.8）。 3.2.2.2 同位素标记的净化内标标准溶液：用壬烷配制含13C12-2,4,4' -TrPCB、13C12-2,3,3',5,5' - PePCB和 13C12-2,2',3,3',5,5',6 -HPCB溶液（见附录 B的表B.9）。 3.2.2.3 同 位 素 标 记 的 回 收 率 内 标 标 准 溶 液 ： 用 壬 烷 配 制 含13C12-2,2',5,5' -TePCB、 13C12-2,2',4',5,5' -PePCB、13C12-2,2',3',4,4',5' -HxPCB和13C12-2,2',3,3',4,4',5,5' -OctaPCB 溶液（见附录 B的表 B.10）。 3.2.2.4 精密度和回收率检查标准溶液 (PAR)：用壬烷配制的含天然 DL-PCBs溶液（见附录 B的表 B.11），用于方法建立时的初始精密度和回收率试验（ IPR）及过程精密度和回收率试验（ OPR）。 3.2.2.5 校正标准溶液：为含有天然（ 目标化合物）和同位素标记（定量内标、净化标准和回收率内 标）的 DL-PCBs 系列校正溶液（见附录 B的表B.12）。其中 CS3用于已建立 RRF的日常校正和校正曲线 校验 (VER)，CS1用于检查 HRGC -HRMS必须具备的灵敏度。 3.2.2.6 高灵敏度检查的标准溶液：为天然 DL-PCBs的溶液（浓度 0.2 μg/L，见附录 B的表B.13）。 3.2.2.7 校正检查的标准溶液： 浓度相当于 CS3， 不含同位素标记， 仅为天然 DL-PCBs的溶液 （ 50 μg/L， 见附录 B的表B.14）。 3.3 样品净化用吸 附剂 注：样品净化用吸附剂应在制备后尽快使用，如果经过一段较长时间的保存，应检验其活性。在装有氧化铝和硅胶 等容器上应标识其制备日期或开封日期。如果标识不可辨认，应废弃吸附剂，重新制备。由于存在 PCBs污染问题，有时 适合于 PCDD/Fs 测定的试剂不一定适合 DL-PCBs的测定，应该经过检查证实没有干扰后使用。 3.3.1 氧化铝 注：如果内标化合物的回收率能达到要求，则可在酸性氧化铝或碱性氧化铝中选择一种用于样品提取液净化。但所 有样品，包括初始精确度和回收率检查试验，均应使用同样类 型的氧化铝。 3.3.1.1 酸性氧化铝：在 130 °C下至少加热活化 12 h。