ICS 65.020 B 62 DB41 河 南 省 地 方 标 准 DB41/T 1226—2016 白蛾周氏啮小蜂人工繁育技术规程 2016-03-18 发布 2016-06-18 实施 河南省质量技术监督局 发布 DB41/T 1226—2016 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河南省林业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：漯河市豫中南林业有害生物天敌繁育研究中心。 本标准主要起草人：陈素贞、张素华、李大银、李俊中、张可银、袁宝多、王静。 本标准参加起草人：许勤勤、姬琨、童玲、孔燕、赵雷、刘曌、亓迪、殷艳辉。 I DB41/T 1226—2016 白蛾周氏啮小蜂人工繁育技术规程 1 范围 本标准规定了白蛾周氏啮小蜂（Chouioia cunea Yang）人工繁育的术语和定义、工艺 流程、基本设施和设备、替代寄主、种蜂、繁育、释放。 本标准适用于以柞蚕（Antheraea pernyi Guerin-Meneville）蛹为替代寄主的白蛾周 氏啮小蜂人工繁育。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用 于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 LY/T 1704—2007 白蛾周氏啮小蜂人工繁育及应用技术规程 SN/T 1374 美国白蛾检疫鉴定方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 白蛾周氏啮小蜂 白 蛾 周 氏 啮 小 蜂 （ Chouioia cunea Yang）， 属 膜翅 目 （ Hymenoptera ），姬 小 蜂 科 （Eulophidae） 。是目前控制美国白蛾、杨小舟蛾等杨树食叶害虫的重要天敌，具有寄生率 高、繁殖力强、雌雄性比大等优点。鉴定特征见附录 A。 3.2 美国白蛾 美国白蛾（Hyphantria cunea），属鳞翅目（Lepidoptera），灯蛾科（Arctiidae）。是 我国进出境检疫性有害生物和林业检疫性有害生物，为食叶害虫。寄主广泛，包括林木、果 树、农作物及野生植物等 370 余种，其中主要是阔叶树。幼虫孵出即吐丝做网幕，并在网幕 内群集，取食树叶。老熟幼虫寻觅树皮裂缝、树洞、树下或浅土层土块、瓦砾、枯枝落叶下 及建筑物缝隙等隐蔽处化蛹。成虫有一定飞翔能力和趋光性。卵多产于寄主树冠周缘叶片背 面。各虫态鉴定执行 SN/T 1374。 3.3 杨小舟蛾 杨 小 舟 蛾 （ Micromelalopha sieversi ）， 属 鳞 翅 目 （ Lepidoptera ）， 舟 蛾 科 （Notodontidae） 。是我省杨树主要食叶害虫之一。幼虫常群集为害，将杨树叶片食光，仅 1 DB41/T 1226—2016 留下叶表皮及叶脉。老熟幼虫吐丝缀叶化蛹，影响植株叶片光合作用。蛹在树洞、落叶、地 下植被物松土内越冬。成虫有一定飞翔能力和趋光性。卵黄绿色，半球形，呈块状排列于叶 面。 3.4 杨扇舟蛾 杨扇舟蛾（Clostera anachoreta），属鳞翅目（Lepidoptera），舟蛾科（Notodontidae）。 是我省主要食叶害虫之一。爆发时经常会将树叶全部吃光，严重影响树木生长。幼虫啃食杨 树叶片，常群集为害，将叶片食光，仅留下叶表皮及叶脉。老熟幼虫吐丝缀叶化蛹，影响植 株叶片光合作用。蛹在树洞、落叶、地下植被物松土内越冬。成虫有一定飞翔能力和趋光性。 卵黄绿色，半球形，呈块状排列于叶面。 3.5 柞蚕 柞蚕（Antheraea pernyi Guerin-Meneville）, 属鳞翅目（Lepidoptera），大蚕蛾科 （Saturniidae）。是一种以栎属树木为食料的经济昆虫，其蛹是人工繁育白蛾周氏啮小蜂 的重要替代寄主。 3.6 人工繁育 根据白蛾周氏啮小蜂的生物学特性（参见附录 B），将其成蜂接入合适的替代寄主，通 过人为控制温度、湿度，使其在寄主体内完成世代发育，增加发育代数，扩大个体数量，用 于美国白蛾、杨小舟蛾、杨扇舟蛾等食叶害虫的生物防治。 3.7 种蜂 自然环境条件下生长发育或室内人工繁育的第 1 代～2 代，个体健壮、适应性和繁殖力 强，用于人工繁育的白蛾周氏啮小蜂。 3.8 复壮 通过更换替代寄主、变温等方法，使人工繁育数代后发生退化的白蛾周氏啮小蜂的各项 指标恢复到正常水平的过程。 4 工艺流程 人工繁育白蛾周氏啮小蜂工艺流程见图 1。 2 DB41/T 1226—2016 削 选茧入库 种蜂采集 检查寄生 茧 选 种蜂扩繁 优选 开箱通风 装 蛹 控温控湿 箱 暗室接蜂 林间释放 养 冷 藏 暖 蜂 图 1 人工繁育白蛾周氏啮小蜂工艺流程 5 基本设施和设备 繁蜂室(7.2m×3.2m×3m)、接蜂室(7.2m×3.2m×3m)、岀蜂室(7.2m×3.2m×3m)、操作 室(8.8m×5.4m×3m)、冷藏室(5m×6m×2.8m)、实验室等。 繁蜂箱(50cm×40cm×15cm)、繁蜂架(1.8m×0.25m×2.18m)、冷暖空调、冰箱（柜） 、 操作台(2m×1.2m×0.6m)、紫外线消毒灯、解剖镜、显微镜、大玻璃试管(30mm×200mm)、 小玻璃试管(10mm×70mm)、玻璃锥形瓶(500ml)、培养皿、干燥箱、恒温恒湿培养箱、人工 气候箱、加湿器、除湿机、相关实验试剂等。 塑料透明广口瓶、削茧刀（转刀）、美工刀、镊子、剪刀、软毛刷、棉花塞、橡皮筋、 75%酒精等。 6 替代寄主 柞蚕茧、柞蚕蛹，储藏温度控制在 0℃～5℃，相对湿度保持在 70%～80%。 7 种蜂 7.1 种蜂采集 野外人工采集美国白蛾蛹或杨小舟蛾蛹，挑选出腹部节间膜拉长、不能回缩、蛹壳光亮 而薄的被寄生蛹，以单蛹放入小玻璃试管，或从其它地方引种。 7.2 优选 从采集羽化的成蜂中选择体壮、个体大、活动能力强的做种蜂，淘汰弱蜂。 7.3 扩繁 7.3.1 寄主准备 7.3.1.1 转刀取蛹 3 DB41/T 1226—2016 将柞蚕茧无茧蒂的一端放入转刀，旋转一周，取出柞蚕蛹。 7.3.1.2 选蛹 观察蛹的颅顶板及蛹体，挑选颅顶板清白透明、环节紧凑、不萎缩、蛹皮坚韧有光泽、 脂肪饱满细腻的健康柞蚕蛹。 7.3.2 瓶内接蜂 将选好的裸蛹，放入锥形瓶内，再用软毛刷轻轻将种蜂扫入。接好后用棉花塞塞紧，接 蜂量1头柞蚕蛹接50～70头蜂。接蜂温度控制在23℃左右，相对湿度保持在60%～70%。 7.3.3 培养箱内繁蜂 接蜂后，将锥形瓶放入培养箱内无光培养，温度控制在23℃左右，相对湿度保持在60%～ 70%。 7.3.4 出蜂 接蜂5～7天后，打开培养箱光源，每天给光16h左右。温度设为25℃左右，湿度保持在 60%～70%，直至出蜂。 8 繁育 8.1 寄主准备 8.1.1 选茧入库 柞蚕茧宜在东北秋茧收获后大量准备。挑选茧壳完整、饱满、新鲜、干燥、无病菌、发 霉、污染、虫蛀鼠咬的柞蚕茧放入冷库，储藏温度控制在 0℃～2℃，相对湿度保持在 70%～ 80%。 8.1.2 削茧 采用三刀破茧法，将柞蚕茧有茧蒂的一端用刀削 1 个口（露出颅顶板，便于观察） ，另 一端削 2 个椭圆形口，孔口直径为 1.5 cm～2.0 cm，以蛹不掉出茧壳为宜。 8.1.3 选蛹 参照 7.3.1.2。 8.2 暗室接蜂 8.2.1 接蜂前准备 接蜂前，对繁蜂器具用75%酒精消毒，接蜂室24h紫外线照射消毒，消毒完成2天后方可 使用。 8.2.2 箱内接蜂法 挑选个体大小相对一致的三孔茧，均匀地放入繁蜂箱中，摆放整齐。在无光的接蜂室内， 将蜂种均匀的敲入繁蜂箱内，接蜂量1头柞蚕蛹接80～90头蜂。接蜂温度控制在23℃左右， 相对湿度保持在60%～70%。 4 DB41/T 1226—2016 8.3 接蜂后管理 8.3.1 繁蜂室准备 启用前，对繁蜂室进行 24h 紫外线照射消毒，消毒完成 2 天后方可使用。 8.3.2 控温控湿培养 接蜂后，将繁蜂箱放在无光繁蜂室内的繁蜂架上，繁蜂温度为 23℃左右，相对湿度保 持在 60%～70%。 8.3.3 开箱通风 接蜂 5～7 天后，开箱通风，并将腐烂变质的柞蚕茧剔除。 8.3.4 检查寄生 接蜂后 10～12 天，开始挑选寄生的柞蚕茧。寄生良好的柞蚕茧，颅顶板黄棕色、有米 粒状、节间拉长不可活动、腹部饱满有光泽。 8.4 出蜂期控制 8.4.1 冷藏 如需要推迟岀蜂，待白蛾周氏啮小蜂发育至老熟幼虫期（接蜂后 10～12 天） ，将被寄生 的柞蚕茧转入 16℃的繁蜂室内，24h 后转入 0℃～5℃的冷藏室中保存（冷藏时间一般不超 过 30 天）。 8.4.2 暖蜂 根据林间放蜂时间，将冷藏的寄生蛹提前取出暖蜂。 暖蜂温度按每1h提高1℃～2℃逐渐升温，1天后控制在25℃左右，并给予自然光照，相 对湿度保持在60%～70%，期间应注意通风。 8.5 出蜂 8.5.1 出蜂时间 应与美国白蛾等杨树食叶害虫的老熟幼虫期和化蛹初期吻合。 8.5.2 出蜂质量要求 8.5.2.1 用于林间释放的柞蚕蛹被白蛾周氏啮小蜂寄生率达到 95% 以上。 8.5.2.2 柞蚕蛹出蜂量每个蛹 4000～5000 头。 8.5.2.3 白蛾周氏啮小蜂雌雄比 85：15 以上。 8.6 复壮 8.6.1 待复壮白蛾周氏啮小蜂 人工繁育 5～6 代后退化的白蛾周氏啮小蜂。 8.6.2 寄主准备 野外采集美国白蛾、杨小舟蛾、杨扇舟蛾等的蛹。 5 DB41/T 1226—2016 8.6.3 小试管内接蜂寄主准备 将选好的美国白蛾、杨小舟蛾、杨扇舟蛾等的蛹，放入小试管内，利用白蛾周氏啮小蜂 的趋光性，将其引入。接好后用棉花塞塞紧，接蜂量 1 头蛹接 10～20 头蜂。接蜂温度控制 在 23℃左右，相对湿度保持在 60%～70%。 8.6.4 培养箱繁蜂 参照7.3.3。 8.6.5 出蜂 参照7.3.4。 9 释放 9.1 时间 应根据各地气候和美国白蛾、杨小舟蛾、杨扇舟蛾发育进度决定。放蜂应选择气温 25℃以上、晴朗、风力小于3级的天气，10∶00～16∶00之间进行。 9.2 次数 放蜂防治应持续进行3～5年，每年2～3代。 9.3 释放量 2 每667m 林地6～8个成品茧。 9.4 释放方法 9.4.1 牛皮纸袋法 将6cm×22cm厘米牛皮纸条折成漏斗状，钉在树干1.5m～1.8m处，把成品茧放入其中。 9.4.2 绳子悬挂法 将绳子穿过三孔茧其中的两个孔，系在树干1.5m～1.8m处。 9.4.3 扎丝悬挂法 扎丝其中一端钉在树干1.5m～1.8m处，另一端