ICS 65.020 B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 26222014 灰飞虱抗药性监测技术规程 Guideline for insecticide resistance monitoring of the small brown planthopper 行业标准信息服务平台 2014-10-17发布 2015-01-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2622—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、南京农业大学、江苏省植物保护站。 本标准主要起草人：张帅、高聪芬、邵振润、张凯、张绍明、张巍、班兰凤。 行业标准信息服务平台 I NY/T 2622—2014 灰飞虱抗药性监测技术规程 1范围 本标准规定了稻苗浸渍法监测灰飞虱[Laodelpharstriatellus（Fallen)］抗药性的方法。 本标准适用于灰飞虱对杀虫剂的抗药性监测。 2试剂与材料 2.1生物试材 试虫：灰飞虱Laodelphar striatellus(Fallen); 供试植物：采用感虫水稻品种，如武育梗3号。 2.2试验药剂 原药。 2.3试验试剂 TritonX-100(或吐温80)；丙酮（或二甲基甲酰胺）；所用试剂一般为分析纯。 3仪器设备 3.1电子天平（感量0.1mg）； 3.2塑料杯（容量：350mL；上口直径：7cm，下口直径：5cm，高：10cm）； 3.3养虫盒（规格：35cm×23cmX13cm）； 3.4移液管(2mL); 3.5容量瓶（10mL、25mL）； 3.6量筒（500mL）； 3.7 烧杯(500mL)； 3.8吸虫器； 3.9移液器； 3. 10 ）人工气候箱：温度（25士1)℃、湿度85%±10%、光照周期16h：8h(L：D)。 信息服务平 4试验步骤 4.1试材准备 4.1.1试虫准备 4.1.1.1试虫采集 选当地具有代表性的农田（如不同作物或品种）3块～5块，每块田随机选取5点用吸虫器等工具采 集生长发育较一致的灰飞虱成虫或若虫，每地采集虫量1000头以上，供室内饲养。 4.1.1.2试虫饲养 大田采集的成虫或若虫，在人工气候箱内（25士1)℃、湿度85%土10%、光照周期16h：8h（L：D） 无土种植的水稻上饲养，以室内饲养的F或F2代生理状态一致的3龄中期若虫供抗药性监测 4.1.2试验水稻准备 将催芽48h的稻种均匀撒于垫有湿滤纸的养虫盒中，置于培养箱中，定时浇水以保持稻苗的正常 1 NY/T2622-2014 生长，6d后，将稻苗（一叶一心，苗高约6cm）分成30株一组，于阴凉处晾至根部无明水，供测试用。 4.2药剂配制 在电子天平上用容量瓶称取一定量的原药，用有机溶剂（如丙酮等，吡蚜酮用二甲基甲酰胺）溶解， 加人终浓度0.1%TritonX-100或0.1%吐温80）用有机溶剂定容，加工成制剂。用移液管吸取一定 量的制剂加人塑料杯中，用蒸馏水稀释配制成一定质量浓度的药液供预备试验。根据预备试验结果，按 照等比梯度设置5个7个系列质量浓度。每质量浓度药液量不宜少于250mL。 4.3处理方法 4.3.1浸药 将试验稻苗在配制好的药液中浸渍10s，取出沥至无水滴下，置于垫有滤纸的塑料杯中。按试验设 计浓度从低到高的顺序重复上述操作，每浓度处理3次以上重复，以含有与最高浓度药液等剂量的有机 溶剂的蒸馏水溶液作空白对照。 4.3.2接虫与培养 在室温晾30min后，用吸虫器将3龄中期若虫移入上述塑料杯中，每杯20头，杯口用保鲜膜封住 并用3号昆虫针扎孔，然后转移至温度为（25士1)℃，相对湿度为85%士10%、光周期16h：8h（L：D) 的人工气候箱中饲养和观察。 4.4结果检查 分别于处理后2d(有机磷类、氨基甲酸酯类及拟除虫菊酯类）、4d(氯化烟酰类和苯基吡唑类)和5d （吡啶甲亚胺杂环类）检查试虫死亡情况，记录总虫数和死虫数。 5数据统计与分析 5.1计算方法 根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式（1)和式（2)计算，计算结果均保留到小数点后两 位： Pr = (1) N 式中： Pi——死亡率，单位为百分率(%)； K—表示死亡虫数，单位为头； N—表示处理总虫数，单位为头。 P-Po ×100 (2) 信息服， 式中： P2一校正死亡率，单位为百分率（%）； P，一一处理死亡率，单位为百分率（%）； Po 空白对照死亡率，单位为百分率（%）。 若对照死亡率<5%，无需校正；对照死亡率在5%～20%之间，应按式（2）进行校正；对照死亡率> 20%，试验需重做。 5.2统计分析 采用SAS、POLO、PROBIT、DPS、SPSS等软件进行统计分析，求出每种药剂的LC5o值及其95%置 信限、b值及其标准误。 6抗性水平的计算与评估 6.1敏感毒力基线 2 NY/T2622—2014 灰飞虱对部分杀虫剂的敏感毒力基线（参见附录A）。 6.2抗药性水平的分级标准 抗药性水平的分级标准见表1。 表1抗药性水平的分级标准 抗药性水平分级 抗性倍数，倍 低水平抗性 5.0<RR≤10.0 中等水平抗性 10.0<RR≤100.0 高水平抗性 RR>100.0 6.3抗药性水平的计算 根据敏感品系的LCso值和测试种群的LCso值，按式（3)计算测试种群的抗性倍数。 RR - （3）) 式中： RR- 测试种群的抗性倍数； T 测试种群的LC5o； S 敏感品系的LC50。 按照抗药性水平的分级标准，对测试种群的抗药性水平做出评估。 行业标准信息服务平台 3 NY/T2622—2014 附录A （资料性附录） 灰飞虱对部分杀虫剂敏感毒力基线 灰飞虱对部分杀虫剂敏感毒力基线见表A.1。 表A.1灰飞虱对部分杀虫剂敏感毒力基线 药剂名称 Slope± SE LCso（95%置信限），mg/L 吡虫啉 2.652±0.401 9.306(7.121~11.555) 噻虫嗪 2.124±0.433 1., 792(1. 339~2. 277) 烯啶虫胺 2.452±0.356 1.231(0.935~1.531) 呋虫胺 2.090±0.341 0.528(0.369~0.698) 吡蚜酮 1.748±0.252 7.996(5.799~10.504) 噻嗪酮 1.21 1.35(0.72~2.33) 毒死蜱 2.132±0.377 0.482(0.362~0.624) 异丙威 2.252±0.365 68.156(48.097~89.278) 丁硫克百威 2.978±0.604 20.328(6.235~30.283) 丁烯氟虫腈 2.152±0.408 0. 708(0.479~0.950) 高效氯氰菊酯 2.167±0.326 2.170(1.643~2.801) 氰戊菊酯 2.137±0.446 9.383(6.628~12.552) 三氟氯氰菊酯 2.229±0.350 4.161(3.101~5.355) 注1：毒死蜱、烯啶虫胺、噻虫嗪及吡蚜酮等4种药剂敏感基线测定所用敏感品系为2002年采自江苏海安的敏感品系。 注2：高效氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氰戊菊酯、吡虫啉、异丙威、呋虫胺、丁硫克百威、丁烯氟虫敏感基线测定所用敏 感品系为2005年采集于江苏无锡市麦田的越冬代灰飞虱成虫、若虫，在室内不接触任何药剂的情况下用武育梗3 号水稻在室内饲养，后经室内单对纯化建立的敏感品系， 注3：噻嗪酮敏感基线数据引自王利华等（昆虫学报，2008）的结果 行业标准信息服务平台 NY/T2622—2014 附录A （资料性附录） 灰飞虱对部分杀虫剂敏感毒力基线 灰飞虱对部分杀虫剂敏感毒力基线见表A.1。 表A.1灰飞虱对部分杀虫剂敏感毒力基线 药剂名称 Slope± SE LCso（95%置信限），mg/L 吡虫啉 2.652±0.401 9.306(7.121~11.555) 噻虫嗪 2.124±0.433 1., 792(1. 339~2. 277) 烯啶虫胺 2.452±0.356 1.231(0.935~1.531) 呋虫胺 2.090±0.341 0.528(0.369~0.698) 吡蚜酮 1.748±0.252 7.996(5.799~10.504) 噻嗪酮 1.21 1.35(0.72~2.33) 毒死蜱 2.132±0.377 0.482(0.362~0.624) 异丙威 2.252±0.365 68.156(48.097~89.278) 丁硫克百威 2.978±0.604 20.328(6.235~30.283) 丁烯氟虫腈 2.152±0.408 0. 708(0.479~0.950) 高效氯氰菊酯 2.167±0.326 2.170(1.643~2.801) 氰戊菊酯 2.137±0.446 9.383(6.628~12.552) 三氟氯氰菊酯 2.229±0.350 4.161(3.101~5.355) 注1：毒死蜱、烯啶虫胺、噻虫嗪及吡蚜酮等4种药剂敏感基线测定所用敏感品系为2002年采自江苏海安的敏感品系。 注2：高效氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氰戊菊酯、吡虫啉、异丙威、呋虫胺、丁硫克百威、丁烯氟虫敏感基线测定所用敏 感品系为2005年采集于江苏无锡市麦田的越冬代灰飞虱成虫、若虫，在室内不接触任何药剂的情况下用武育梗3 号水稻在室内饲养，后经室内单对纯化建立的敏感品系， 注3：噻嗪酮敏感基线数据引自王利华等（昆虫学报，2008）的结果 行业标准信息服务平台