书 书 书犐犆犛 ６７ ． ０４０ 犡 ８０ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２２７２９ — ２００８ 海洋鱼低聚肽粉 犗犾犻犵狅狆犲狆狋犻犱犲狊狆狅狑犱犲狉狅犳犿犪狉犻狀犲犳犻狊犺 ２００８  １２  ３１ 发布 ２００９  ０８  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准的附录 Ａ 为规范性附录 。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出 。 本标准由全国特殊膳食标准化技术委员会归口 。 本标准起草单位 ： 中国食品发酵工业研究院 、 浙江海氏生物科技有限公司 、 北京中食海氏生物技术 有限公司 、 北京同仁堂健康药业股份有限公司 、 江南大学分析测试中心 。 本标准主要起草人 ： 蔡木易 、 易维学 、 陈岩 、 戴军 、 张宏 、 徐亚光 、 谷瑞增 、 张如民 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２２７２９ — ２００８ 海洋鱼低聚肽粉 １ 　 范围 本标准规定了海洋鱼低聚肽粉的产品分类 、 技术要求 、 试验方法 、 检验规则以及标签 、 包装 、 运输和 贮存 。 本标准适用于海洋鱼低聚肽粉产品的生产 、 检验和销售 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ２７３３ 　 鲜 、 冻动物性水产品卫生标准 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．２ 　 食品卫生微生物学检验 　 菌落总数测定 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．３ 　 食品卫生微生物学检验 　 大肠菌群测定 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．４ 　 食品卫生微生物学检验 　 沙门氏菌检验 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．５ 　 食品卫生微生物学检验 　 志贺氏菌检验 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．１０ 　 食品卫生微生物学检验 　 金黄色葡萄球菌检验 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．１５ 　 食品卫生微生物学检验 　 霉菌和酵母计数 ＧＢ ／ Ｔ５００９．３ 　 食品中水分的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．４ 　 食品中灰分的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．５ 　 食品中蛋白质的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１１ 　 食品中总砷及无机砷的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１２ 　 食品中铅的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１５ 　 食品中镉的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１７ 　 食品中总汞及有机汞的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．９２ 　 食品中钙的测定 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１２４ 　 食品中氨基酸的测定 ＧＢ ／ Ｔ９６９５．２３ 　 肉与肉制品 　 羟脯氨酸含量测定 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 ３ ． １ 海洋鱼低聚肽粉 　 狅犾犻犵狅狆犲狆狋犻犱犲狊狆狅狑犱犲狉狅犳犿犪狉犻狀犲犳犻狊犺 以海洋鱼皮 、 鱼骨或鱼肉为原料 ， 用酶解法生产的 、 相对分子质量低于 １０００ｕ 的低聚肽 （ 短肽 ） 为 主要成分的粉末状产品 。 ３ ． ２ 胶原 　 犮狅犾犾犪犵犲狀 鱼 、 牛 、 猪等动物的皮 、 骨等组织中一类含特有的羟脯氨酸的无支链纤维蛋白质 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２２７２９ — ２００８ ４ 　 产品分类 ４ ． １ 　 分类原则 产品按原料分为三类 。 ４ ． ２ 　 类别 ４ ． ２ ． １ 　 海洋鱼皮胶原低聚肽粉 以海洋鱼皮为原料生产的低聚肽粉产品 。 ４ ． ２ ． ２ 　 海洋鱼骨胶原低聚肽粉 以海洋鱼骨为原料生产的低聚肽粉产品 。 ４ ． ２ ． ３ 　 海洋鱼肉低聚肽粉 以海洋鱼肉为原料生产的低聚肽粉产品 。 ５ 　 技术要求 ５ ． １ 　 原辅材料 海洋鱼皮 、 海洋鱼骨 、 海洋鱼肉 ： 应符合 ＧＢ２７３３ 规定的要求 。 其他原辅材料应符合相应的国家标 准或行业标准 。 ５ ． ２ 　 感官特性 产品的感官特性应符合表 １ 的规定 。 表 １ 项 　　 目 特 　　 性 形 　　 态 粉末状 ， 无结块 色 　　 泽 白色或淡黄色 杂 　　 质 无正常视力可见的外来杂质 ５ ． ３ 　 理化指标 产品的理化指标应符合表 ２ 的规定 。 表 ２ 项 　　 目指 　　　 标 海洋鱼皮胶原低聚肽粉海洋鱼骨胶原低聚肽粉海洋鱼肉低聚肽粉 总氮 （ 以干基计 ）／ ％ ≥ １４．５ １３．５ １３．５ 低聚肽 （ 以干基计 ）／ ％ ≥ ８５．０ ７５．０ ８０．０ 羟脯氨酸 ／ ％ ≥ ３．０ ２．０ — 钙 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） ≥ — ４００ — 灰分 ／ ％ ≤ ７．０ — ７．０ 相对分子质量小于 １０００ｕ 的蛋白质 水解物所占比例 ／ ％ ≥ ８５．０ 干燥失重 ／ ％ ≤ ７．０ ５ ． ４ 　 污染物指标 产品中污染物指标应符合表 ３ 的规定 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２２７２９ — ２００８ 表 ３ 项 　　　 目 指 　　　 标 无机砷 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） ≤ ０．５ 铅 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） ≤ ０．５ 镉 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） ≤ ０．１ 甲基汞 ／（ ｍｇ ／ ｋｇ ） ≤ ０．５ ５ ． ５ 　 微生物指标 产品中微生物指标应符合表 ４ 的规定 。 表 ４ 项 　　　 目 指 　　　 标 菌落总数 ／（ ＣＦＵ ／ ｇ ） ≤ ５０００ 大肠菌群 ／（ ＭＰＮ ／ １００ｇ ） ≤ ３０ 霉菌 ／（ ＣＦＵ ／ ｇ ） ≤ ２５ 酵母 ／（ ＣＦＵ ／ ｇ ） ≤ ２５ 致病菌 （ 沙门氏菌 、 志贺氏菌 、 金黄色葡萄球菌 ） 不得检出 ６ 　 试验方法 ６ ． １ 　 感官检验 称取 １０ｇ 样品 ， 散放在白色搪瓷平盘中 ， 在自然光下直接观察样品的形态 、 色泽和杂质 。 ６ ． ２ 　 总氮 按照 ＧＢ ／ Ｔ５００９．５ 规定的方法测定 。 测定结果不进行蛋白质系数换算 ， 以总氮质量分数表示 。 ６ ． ３ 　 低聚肽 ６ ． ３ ． １ 　 方法提要 低分子质量的蛋白质水解物 （ 包括低聚肽及游离氨基酸 ） 可溶于三氯乙酸溶液 ； 高分子质量的蛋白 质在三氯乙酸溶液中易沉淀 。 样品经三氯乙酸溶液溶解后 ， 离心分离出沉淀蛋白质 ， 收集离心清液 。 按 照 ＧＢ ／ Ｔ５００９．５ 规定的方法测定离心清液的酸溶蛋白质水解物含量 ， 清液的酸溶蛋白质水解物含量减 去游离氨基酸含量得到低聚肽的含量 。 ６ ． ３ ． ２ 　 分析步骤 ６ ． ３ ． ２ ． １ 　 酸溶蛋白质水解物含量的测定 称取 ２ｇ （ 精确至 ０．００１ｇ ） 样品 ， 加入 １０ｍＬ１５％ 三氯乙酸溶液 ， 混合均匀 ， 静置 １０ｍｉｎ 。 将样品溶 液在 ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 下离心 １０ｍｉｎ 后 ， 取全部离心清液 ， 按 ＧＢ ／ Ｔ５００９．５ 规定的方法测定清液的蛋白质 水解物含量 ， 计算出样品中酸溶蛋白质水解物含量 。 蛋白质换算系数为 ６．２５ ， 检验结果根据样品的干 燥失重 ， 折算为干基 。 ６ ． ３ ． ２ ． ２ 　 游离氨基酸含量的测定 ６ ． ３ ． ２ ． ２ ． １ 　 氨基酸自动分析仪测定法 称取 ０．０２ｇ ～ ０．０３ｇ 样品 ， 精确至 ０．０００１ｇ ， 用 ３．５％ 磺基水杨酸溶液溶解均匀 。 将样品溶液转移 至 ５０ｍＬ 容量瓶中 ， 定容 。 将样品溶液在转速为 ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心机上离心 ５ｍｉｎ ， 取离心清液 ， 再用 ０．４５ μ ｍ 微孔滤膜过滤离心清液 ， 将滤液转移至 ５０ｍＬ 容量瓶中 ， 定容摇匀备用 ， 然后按照 ＧＢ ／ Ｔ５００９．１２４ 规定的方法 ， 用氨基酸自动分析仪测定其游离氨基酸含量 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ２２７２９ — ２００８ ６ ． ３ ． ２ ． ２ ． ２ 　 高效液相色谱仪测定法 ６ ． ３ ． ２ ． ２ ． ２ ． １ 　 方法提要 用三氯乙酸沉淀蛋白质后 ， 以邻苯二甲醛 （ ＯＰＡ ） 和氯甲酸芴甲酯 （ ＦＭＯＣ — Ｃｌ ） 分别作为一级氨基 酸和二级氨基酸的衍生反应试剂 ， 采用柱前自动衍生化反相高效液相色谱法测定海洋鱼低聚肽粉中的 游离氨基酸总量 。 ６ ． ３ ． ２ ． ２ ． ２ ． ２ 　 仪器 ａ ） 　 高效液相色谱仪 ： 配四元梯度泵 ， 紫外检测器 ， 自动进样器和化学工作站软件及在线脱气机 。 ｂ ） 　 分析天平 ： 感量 ０．０００１ｇ 。 ｃ ） 　 ｐＨ 计 。 ６ ． ３ ． ２ ． ２ ． ２ ． ３ 　 试剂 三乙胺 、 四氢呋喃 、 乙酸 、 硼酸 ， 均为分析纯 ； 甲醇 、 乙腈 、 氨基酸标准品 、 邻苯二甲醛 （ ＯＰＡ ）、 氯甲酸 芴甲酯 （ ＦＭＯＣ — Ｃｌ ） 均为色谱纯 ； 超纯水 。 ６ ． ３ ． ２ ． ２ ． ２ ． ４ 　 测定 称取样品 ０．５ｇ ， 精确至 ０．０００１ｇ ， 于 ２５ｍＬ 容量瓶中 ， 加 ５％ 三氯乙酸 １０ｍＬ 沉淀 ２ｈ ， 定容摇匀 ， 过滤 ， 于 １００００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 １５ｍｉｎ ， 取上清液上机 ， 采用外标法进行测定 。 色谱条件 ： 分析柱 ： ＨｙｐｅｒｓｉｌＡＡＯＤＳ ， ５ μ ｍ ， ２００ｍｍ×２．１ｍｍ （ 内径 ）。 流动相 ： Ａ 液 ： 含 ０．０１８％ 三乙胺 （ ＴＥＡ ） 的 ２０ｍｍｏｌ ／ Ｌ 乙酸钠缓冲液 ， 用稀乙酸调至 ｐＨ７．２ ， 加 ０．３％