书 书 书犐犆犛 ６５ ． ０２０ 犅 １６ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２２１０１ ． ５ — ２００９ 棉花抗病虫性评价技术规范 第 ５ 部分 ： 黄萎病 犜犲犮犺狀犻犮犪犾狊狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀犳狅狉犲狏犪犾狌犪狋犻狀犵狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲狅犳犮狅狋狋狅狀狋狅 犱犻狊犲犪狊犲狊犪狀犱犻狀狊犲犮狋狆犲狊狋狊 — 犘犪狉狋 ５ ： 犞犲狉狋犻犮犻犾犾犻狌犿狑犻犾狋 ２００９  １０  ３０ 发布 ２００９  １２  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 ＧＢ ／ Ｔ２２１０１ 《 棉花抗病虫性评价技术规范 》 分为以下五个部分 ： ——— 第 １ 部分 ： 棉铃虫 ； ——— 第 ２ 部分 ： 蚜虫 ； ——— 第 ３ 部分 ： 红铃虫 ； ——— 第 ４ 部分 ： 枯萎病 ； ——— 第 ５ 部分 ： 黄萎病 。 本部分是 ＧＢ ／ Ｔ２２１０１ 的第 ５ 部分 。 本部分的附录 Ｂ 为规范性附录 ， 附录 Ａ 为资料性附录 。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口 。 本部分起草单位 ： 中国农业科学院植物保护研究所 、 全国农业技术推广服务中心 。 本部分主要起草人 ： 简桂良 、 孙文姬 、 马存 、 石磊岩 、 邹亚飞 、 郭荣 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２２１０１ ． ５ — ２００９ 棉花抗病虫性评价技术规范 第 ５ 部分 ： 黄萎病 １ 　 范围 ＧＢ ／ Ｔ２２１０１ 的本部分规定了棉花抗黄萎病 ［ 病原菌 ： 大丽轮枝菌 （ 犞犲狉狋犻犮犻犾犾犻狌犿犱犪犺犾犻犪犲 Ｋｌｅｂ． ）］ 鉴 定方法和抗性评定标准 。 本部分适用于棉花抗黄萎病性鉴定和抗性评定 。 ２ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于 ＧＢ ／ Ｔ２２１０１ 的本部分 。 ２ ． １ 发病率 　 狉犪狋犲狅犳犻狀犳犲犮狋犲犱 发病棉苗占总棉苗数的百分率 。 ２ ． ２ 病情指数 　 犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓 全面考核发病率和严重程度的综合指标 。 ３ 　 病原菌的培养 ３ ． １ 　 培养病原菌的基本设备 恒温箱 、 超净工作台 、 高压灭菌锅 、 冰箱 、 可控温的温室 （ 使温度保持在 ２０℃ ～ ２８℃ 之间 ）、 铝锅 、 电 炉 、 培养皿 、 试管 、 剪子 、 镊子 、 广口瓶 、 酒精灯等 。 ３ ． ２ 　 棉黄萎病病原菌培养 棉花黄萎病菌 （ 参见附录 Ａ ） 菌种培养物采用棉籽或麦粒砂 ， 先将棉籽或麦粒用水煮涨为止 ， 沥干水 分后 ， 装入广口瓶 ， 高压湿热灭菌 ２ｈ ； 在超净工作台上将已培养好的黄萎病菌平板或斜面接入其中 ， 随 后置于 ２５℃ 恒温箱培养 １０ｄ ～ １５ｄ 。 ４ 　 棉花黄萎病病圃的建立 ４ ． １ 　 病圃的要求 人工黄萎病圃应建立在适宜地区 ， 即有利于黄萎病发生的地区 ， 发病均匀 ； 要求正常年份 ， 感病对照 的病情指数达到 ４０．０ ～ ６０．０ 之间 ， 受气候条件的影响较小 ； 应以我国广泛分布的强致病力菌系为宜 。 棉花黄萎病的抗性鉴定采用 “ 田间人工病圃成株期鉴定方法 ” 鉴定 。 适宜地区为夏季 ７ 月份 、 ８ 月份平 均气温超过 ２８℃ 的时间少于 ２０ｄ ， 北纬 ３８ 度以上地区 。 ４ ． ２ 　 鉴定所用病原菌种 各地可根据当地的优势菌群 ， 选择适宜强致病力菌系 。 ４ ． ３ 　 病圃的建立 按每公顷 ４５０ｋｇ ～ ７５０ｋｇ 的接种量 ， 将培养好的菌种均匀地施入田间 ， 再翻耕 ２ 遍 ～ ３ 遍 ， 使病菌 与土壤混均匀 。 以感病品种在病圃各小区发病均匀 、 病情指数达 ５０ 左右即可 。 病圃建立后 ， 可根据当 年的发病情况将当年的病棉杆压碎进行回接 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２２１０１ ． ５ — ２００９ ５ 　 棉花品种 （ 系 ） 抗黄萎病性鉴定 ５ ． １ 　 标准对照 鉴定中选用一个感病对照 ， 要求高度感病且稳定性好 ， 可选用 “ 冀棉 １１ 号 ” 或 “ 鄂荆 １ 号 ” 或本地区 的高度感病品种 ， 选择标准为在正常年份病情指数 ５０．０ 以上 。 ５ ． ２ 　 鉴定材料种植方法 鉴定材料种植在人工病圃中 ， ３ 次重复 ， 每重复 ２ 行 ， 行长 ６ｍ ～ １０ｍ ， 小区株数不少于 ５０ 株 ， 按棉 花正常的播种时间和田间管理方式进行种植 ， 保持田间的适当湿度 ， 以利于黄萎病的发生 。 ５ ． ３ 　 棉花的管理 播种后 ， 进行精心管理 ， 苗期应注意防治立枯 、 红腐病等苗期病害 ， 苗蚜 、 地下害虫等虫害 。 进入雨 季前 ， 应注意保持田间的湿度 。 其他管理同大田 。 ５ ． ４ 　 发病调查 ６ 月份后 ， 棉花黄萎病陆续开始发生 ， 在花铃期达到发病高峰 ， 故从 ６ 月中旬开始 ， 即应密切注意各 品种的黄萎病发生情况 ， 在感病对照病情指数达 ４０．０ 以上时 ， 应开始全面调查 ， 调查鉴定结果记录到鉴 定结果原始记录表 ， 见附录 Ｂ 。 采用 ５ 级分级法 ， 可进行数次调查 ， 当感病对照病情指数达 ５０ 左右时 ， 应全面调查各品种的发病率 ， 计算病情指数 ， 进行校正后 ， 评判各品种的抗病水平 。 ５ ． ５ 　 调查分级标准 田间棉花黄萎病的主要症状为叶枯型和黄斑型 ， 叶片出现掌状黄条斑 ， 叶肉枯黄 ， 仅叶脉保持绿色 ， 出现西瓜皮状斑驳 ， 有时也出现叶枯型 ， 以致叶片枯萎 ， 脱落 ， 棉株死亡 。 各病级分级标准如下 ： ０ 级 ： 棉株健康 ， 无病叶 ， 生长正常 。 １ 级 ： 棉株四分之一以下叶片发病 ， 变黄萎蔫 。 ２ 级 ： 棉株四分之一以上 、 二分之一以下叶片发病 ， 变黄萎蔫 。 ３ 级 ： 棉株二分之一以上 、 四分之三以下叶片发病 ， 变黄萎蔫 。 ４ 级 ： 棉株四分之三以上叶片发病 ， 或叶片全部脱落 ， 棉株枯死 。 ６ 　 调查结果的统计 根据调查的结果计算各品种的发病率和病情指数 。 发病率以 “ 犚犻 ” 计 ， 数值以 “ ％ ” 表示 ， 按式 （ １ ） 计算 ： 犚犻 ＝ 狀 ｉ 狀 ｔ × １００ …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 狀 ｉ ——— 发病株数 ； 狀 ｔ ——— 总株数 。 计算结果精确到小数点后两位 。 病情指数以 “ 犇犐 ” 计 ， 按式 （ ２ ） 计算 ： 犇犐 ＝ ∑ 犱 ｃ × 狀 （ ） ｃ 狀 ｔ × ４ × １００ …………………………（ ２ ） 　　 式中 ： 犱 ｃ ——— 相应病级 ； 狀 ｃ ——— 各病级病株数 ； 狀 ｔ ——— 总株数 。 计算结果精确到小数点后两位 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２２１０１ ． ５ — ２００９ ７ 　 鉴定结果的校正 由于鉴定的外界条件 ， 包括地区间不可能完全一致 ， 即使同一地区年度间 、 批次间鉴定结果也可能 存在差异 。 为此 ， 应对鉴定结果进行校正 ， 即采用相对病情指数进行校正 。 方法为 ： 鉴定中必须设感病 对照 ， 在感病对照病情指数达 ５０．０ 以上时进行发病调查 ， 由于感病对照病情指数不可能刚好为 ５０．０ ， 为此 ， 采用校正系数 犓 来进行校正 ， 犓 值的求法按式 （ ３ ） 计算 ： 犓 ＝ ５０ ． ００ 犇犐 ＣＫ …………………………（ ３ ） 　　 式中 ： ５０．００ ——— 感病对照标准病情指数 ； 犇犐 ＣＫ ——— 本次鉴定感病对照病情指数 。 用 犓 值与本次鉴定中被鉴定品种的病情指数相乘 ， 求得被鉴定品种的相对病情指数 （ 犚犇犐 ）， 犚犇犐 按式 （ ４ ） 计算 ： 犚犇犐 ＝ 犇犐 × 犓 …………………………（ ４ ） 　　 式中 ： 犇犐 ——— 被鉴定品种病情指数 ； 犓 ——— 校正系数 。 以 犓 值在 ０．７５ ～ １．２５ （ 相当于病情指数 ６６．６７ ～ ４０．００ ） 范围之间的鉴定结果为准确可靠 。 同一供试品种应连续鉴定 ２ 年 ， 以确保准确 。 ８ 　 鉴定结果的评价 根据被鉴定品种的相对病情指数的大小评定品种的抗性级别 ， 各级别评定标准如表 １ 。 表 １ 　 棉花品种抗黄萎病性评定标准 级 　　 别 抗性类型 英文缩写 相对病情指数标准 １ 免疫 Ｉ 犚犇犐 ＝０ ２ 高抗 ＨＲ ０ ＜ 犚犇犐 ≤ １０．０ ３ 抗病 Ｒ １０．０ ＜ 犚犇犐 ≤ ２０．０ ４ 耐病 Ｔ ２０．０ ＜ 犚犇犐 ≤ ３５．０ ５ 感病 Ｓ 犚犇犐 ＞ ３５．０ ３ 犌犅 ／ 犜 ２２１０１ ． ５ — ２００９ 附 　 录 　 犃 （ 资料性附录 ） 棉花黄萎病病原 犃 ． １ 　 学名 大丽轮枝菌 （ 犞犲狉狋犻犮犻犾犾犻狌犿犱犪犺犾犻犪犲 Ｋｌｅｂ． ） 属真菌界 （ Ｆｕｎｇｉ ）， 半知菌亚门 （ Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａ ）， 丝孢 纲 （ Ｈｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ ）， 丝孢目 （ Ｈｙｐｈｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ ）， 淡色孢科 （ Ｍｏｎｉｌｉａｃｅａｅ ）， 轮枝孢属 （ 犞犲狉狋犻犮犻犾犾犻狌犿 ）， 大丽 轮枝菌 （ 犞犲狉狋犻犮犻犾犾犻狌犿犱犪犺犾犻犪犲 Ｋｌｅｂ． ）。 犃 ． ２ 　 培养特性和孢子形态 初生菌丝体无色 ， 后变橄榄褐色 ， 有分隔 ， 直径 ２ μ ｍ ～ ４ μ ｍ 。 菌丝体常呈膨胀状 ， 可单根或数根菌 丝芽殖为微菌核 。 不同地区棉花黄萎病菌微菌核产生的数量 、 大小和形状有明显的差异 。 分生孢子呈椭圆形 ， 单