书 书 书犐犆犛 ６７ ． １２０ 犡 ０４ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２１３１６ — ２００７ 动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱  质谱 ／ 质谱法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狉犲狊犻犱狌犲狊狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀 — 犔犆犕犛 ／ 犕犛 ２００７  １０  ２９ 发布 ２００８  ０４  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准的附录 Ａ 、 附录 Ｂ 和附录 Ｃ 为资料性附录 。 本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中华人民共和国山东出入境检验检疫局 、 中华人民共和国吉林出入境检验检疫 局 、 中国检验检疫科学研究院 。 本标准主要起草人 ： 林黎明 、 张鸿伟 、 王凤美 、 牟俊 、 彭涛 、 荣会 、 梁增辉 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２１３１６ — ２００７ 动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱  质谱 ／ 质谱法 １ 　 范围 本标准规定了动物源性食品中磺胺类共计 ２３ 种磺胺药物残留量高效液相色谱  质谱 ／ 质谱测定 方法 。 本标准适用于肝 、 肾 、 肌肉 、 水产品和牛奶等动物源性食品中磺胺脒 、 甲氧苄啶 、 磺胺索嘧啶 、 磺胺醋 酰 、 磺胺嘧啶 、 磺胺吡啶 、 磺胺噻唑 、 磺胺甲嘧啶 、 磺胺 鱼 剌 唑 、 磺胺二甲嘧啶 、 磺胺甲氧嗪 、 磺胺甲二唑 、 磺 胺对甲氧嘧啶 、 磺胺间甲氧嘧啶 、 磺胺氯达嗪 、 磺胺多辛 、 磺胺甲 鱼 剌 唑 、 磺胺异 鱼 剌 唑 、 磺胺苯酰 、 磺胺地索 辛 、 磺胺喹沙啉 、 磺胺苯吡唑和磺胺硝苯残留量的定性确证和定量测定 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — １９９２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 （ ｎｅｑＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ） ３ 　 原理 试样中加入 Ｃ １８ 填料后研磨均匀 ， 其中磺胺类药物残留用乙腈  水在微波辐照辅助下进行提取 ， 用乙 腈饱和的正己烷液液分配净化 。 用液相色谱  质谱 ／ 质谱测定 ， 外标法定量 。 ４ 　 试剂和材料 除另有说明外 ， 所用试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — １９９２ 规定的一级水 。 ４ ． １ 　 乙腈 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ 　 甲酸 ： 优级纯 。 ４ ． ３ 　 正己烷 ： 色谱纯 。 ４ ． ４ 　 正丙醇 。 ４ ． ５ 　 无水硫酸钠 ： 优级纯 ， ５００℃ 灼烧 ４ｈ ， 置于干燥器中备用 。 ４ ． ６ 　 Ｃ １８ 填料 ： ４０ μ ｍ 。 ４ ． ７ 　 硅藻土 ： 化学纯 。 ４ ． ８ 　 乙腈  水 （ １０００＋３０ ） 溶液 ： 量取 １０００ｍＬ 乙腈 ， 加入 ３０ｍＬ 水 ， 混合均匀 。 ４ ． ９ 　 乙腈  水 （ １＋１ ） 溶液 ： 将乙腈 （ ４．１ ） 与水按体积比 １∶１ 混合均匀 。 ４ ． １０ 　 水  甲酸 （ ９９９＋１ ）： 准确吸取 １ｍＬ 甲酸 （ ４．２ ） 于 １０００ｍＬ 容量瓶中 ， 用水稀释到刻度 ， 混匀 。 ４ ． １１ 　 乙腈饱和正己烷 ： 量取 ２００ｍＬ 正己烷 （ ４．３ ） 于 ２５０ｍＬ 分液漏斗中 ， 加于少量乙腈 ， 剧烈振摇数 分钟 ， 静止分层后 ， 弃去下层乙腈层即得 。 ４ ． １２ 　 标准物质 ： 磺胺脒 （ ｓｕｌｆａｇｕａｎｉｄｉｎｅ ， ＳＧＮ ）、 甲氧苄啶 （ ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ ， ＴＭＰ ）、 磺胺索嘧啶 （ ｓｕｌｆｉｓｏ ｍｉｄｉｎｅ ， ＳＩＭ ）、 磺胺醋酰 （ ｓｕｌｆａｃｅｔａｍｉｄｅ ， ＳＡＡ ）、 磺胺嘧啶 （ ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ ， ＳＤＺ ）、 磺胺吡啶 （ ｓｕｌｆａｐｙｒｉ ｄｉｎｅ ， ＳＰＤ ）、 磺胺噻唑 （ ｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ ， ＳＴＺ ）、 磺胺甲嘧啶 （ ｓｕｌｆａｍｅｒａｚｉｎｅ ， ＳＭＲ ）、 磺胺 /G21 唑 （ ｓｕｌｆａｍｏｘ ｏｌｅ ， ＳＭＯ ）、 磺胺二甲嘧啶 （ ｓｕｌｆａｄｉｍｉｄｉｎｅ ， ＳＤＭ ）、 磺胺甲氧嗪 （ ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ ， ＳＭＰ ）、 磺胺甲 １ 犌犅 ／ 犜 ２１３１６ — ２００７ 二唑 （ ｓｕｌｆａｍｅｔｈｉｚｏｌｅ ， ＳＭＴ ）、 磺胺对甲氧嘧啶 （ ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘｙｄｉａｚｉｎｅ ， ＳＭＤ ）、 磺胺间甲氧嘧啶 （ ｓｕｌｆａｍ ｏｎｏｍｅｔｈｏｘｉｎｅ ， ＳＭＭ ）、 磺胺氯达嗪 （ ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ ， ＳＣＰ ）、 磺胺多辛 （ ｓｕｌｆａｄｏｘｉｎｅ ， ＳＤＸ ）、 磺胺甲 /G21 唑 （ ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ ， ＳＭＺ ）、 磺胺异 /G21 唑 （ ｓｕｌｆａｆｕｒａｚｏｌｅ ， ＳＦＺ ）、 磺胺苯酰 （ ｓｕｌｆａｂｅｎｚａｍｉｄｅ ， ＳＢＡ ）、 磺 胺地索辛 （ ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｉｎｅ ， ＳＤＴ ）、 磺胺喹沙啉 （ ｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ ， ＳＱＸ ）、 磺胺苯吡唑 （ ｓｕｌｆａｐｈｅｎａｚｏｌｅ ， ＳＰＡ ）、 磺胺硝苯 （ ｓｕｌｆａｎｉｔｒａｎ ， ＳＡＮ ）， 纯度大于等于 ９９％ 。 ４ ． １３ 　 ２３ 种磺胺标准储备溶液 ： ０．１ｍｇ ／ ｍＬ 。 分别准确称取按其纯度折算为 １００％ 的每种磺胺标准物 质 （ ４．１２ ） １０．０ｍｇ ， 用乙腈溶解并定容至 １００ｍＬ ， 该标准储备溶液 －２０℃ 避光保存 ， 有效期 １２ 个月 。 ４ ． １４ 　 ２３ 种磺胺混合标准中间溶液 ： １０ μ ｇ ／ ｍＬ 。 准确移取各种磺胺类标准储备溶液 （ ４．１３ ） １０ｍＬ 于 １００ｍＬ 棕色容量瓶中 ， 用乙腈定容至刻度 。 该混合标准中间溶液在 －２０℃ 避光保存 ， 有效期 ６ 个月 。 ４ ． １５ 　 ２３ 种磺胺混合标准工作溶液 ： 根据需要用乙腈  水 （ ４．９ ） 由混合标准中间溶液 （ ４．１４ ） 稀释成合适 的混合标准工作溶液 ， 现用现配 。 ５ 　 仪器和设备 ５ ． １ 　 液相色谱  质谱串联仪 ： 配有电喷雾离子源 。 ５ ． ２ 　 高速组织捣碎机 。 ５ ． ３ 　 均质器 。 ５ ． ４ 　 旋转蒸发器 。 ５ ． ５ 　 氮吹仪 。 ５ ． ６ 　 涡旋混匀器 。 ５ ． ７ 　 分析天平 ： 感量 ０．１ｍｇ 和 ０．０１ｇ 各一台 。 ５ ． ８ 　 真空泵 。 ５ ． ９ 　 移液器 ： １ｍＬ ， ２ｍＬ 。 ５ ． １０ 　 棕色鸡心瓶 ： １５０ｍＬ 。 ５ ． １１ 　 样品瓶 ： ２ｍＬ ， 带聚四氟乙烯旋盖 。 ５ ． １２ 　 大号玻璃研钵 。 ５ ． １３ 　 ｐＨ 计 ： 测量精度 ±０．２ 。 ５ ． １４ 　 离心机 。 ５ ． １５ 　 棕色分液漏斗 ： １００ｍＬ 。 ５ ． １６ 　 具螺旋盖聚四氟乙烯离心管 ： ５０ｍＬ 。 ５ ． １７ 　 超纯水仪 。 ５ ． １８ 　 微波炉 ： 家用 ， 带有光波模式 ， 功率 ７００Ｗ 。 ５ ． １９ 　 超声波发生器 。 ６ 　 试样制备与保存 ６ ． １ 　 肌肉 、 内脏 、 鱼和虾 从原始样品中取出代表性样品 ， 经高速组织捣碎机均匀捣碎 ， 用四分法缩分出适量试样 ， 均分成两 份 ， 分别装入清洁容器内 ， 加封后作出标记 ， 一份作为试样 ， 一份作为留样 。 将试样于 －２０℃ 保存 。 ６ ． ２ 　 肠衣 从原始样品中取出代表性样品 ， 用剪刀剪成 ４ｍｍ ２ 的碎片 ， 用四分法缩分出适量试样 ， 均分成两 份 ， 分别装入洁净容器内 ， 加封后作出标记 ， 一份作为试样 ， 一份作为留样 。 将试样于 －２０℃ 保存 。 ６ ． ３ 　 牛奶 从原始样品中取出代表性样品 ， 用组织捣碎机充分混匀 ， 均分成两份 ， 分别装入洁净容器内 ， 加封后 作出标记 ， 一份作为试样 ， 一份作为留样 。 将试样于 ４℃ 避光保存 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２１３１６ — ２００７ ７ 　 样品处理 ７ ． １ 　 提取 ７ ． １ ． １ 　 肌肉 、 内脏 、 鱼 、 虾和肠衣 称取 ２ｇ （ 精确至 ０．０１ｇ ） 试样置于玻璃研钵内 ， 再称取约 ６ｇ （ 精确至 ０．０１ｇ ） Ｃ １８ 填料 （ ４．６ ） 加至试 样上用玻璃杵轻轻研磨 ， 使样品与填料混合均匀 （ 色泽均一 ， 状态分散 ）， 装于 ５０ｍＬ 具螺旋盖聚四氟乙 烯离心管中 ， 加入 ２５ｍＬ 乙腈  水溶液 （ ４．８ ）， 旋涡振荡 １ｍｉｎ ， 放入家用微波炉中在光波模式下微波辐 照 ３０ｓ ， ３０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ５ｍｉｎ ， 将乙腈层移入 １００ｍＬ 棕色分液漏斗中 。 离心后的沉淀物再加入 ２５ｍＬ 乙腈摇匀 ， 微波辅助提取 ３０ｓ ， ３０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ５ｍｉｎ ，