书书书犐犆犛６５．１５０ 犅５１ 中华人民共和国国家标准 犌犅２１０４７—２００７ 眼斑拟石首鱼 犚犲犱犱狉狌犿 ２００７０６２６发布 ２００７１００１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布ê2017^t3g23eåwÿg,hQƏlN:c¨ƒP`' hQÆÿS÷e9N:GB/T 21047-20070书书书前　　言 　　本标准的第３、５、６章为强制性的，其余为推荐性的。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、国家海洋局第一海洋研究所、中国海洋 大学。 本标准主要起草人：刘世禄、王波、高天翔、王建坤。 Ⅰ 犌犅２１０４７—２００７h9cnN-SNNºlQqTŒVýVý[¶hQÆQlTJ (2017^t{,7 S÷) TŒ_:R6`'hQÆetT|¾{€~Ӌºÿg,hQƁê2017 ^t3g23eåwÿlN:c¨ƒP`'hQÆÿN Q_:R6bgˆL0 眼斑拟石首鱼 １　范围 本标准规定了眼斑拟石首鱼（ 犛犮犻犪犲狀狅狆狊狅犮犲犾犾犪狋狌狊 ）的形态构造特征、生长与繁殖、细胞学特征、生化 遗传特征以及检测方法等。 本标准适用于眼斑拟石首鱼的种质鉴定和检测。 ２　规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 ＧＢ／Ｔ１８６５４．３　养殖鱼类种质检验　第３部分：性状测定 ＧＢ／Ｔ１８６５４．１２　养殖鱼类种质检验　第１２部分：染色体组型分析 ３　名称与分类 ３．１　学名 眼斑拟石首鱼　 犛犮犻犪犲狀狅狆狊狅犮犲犾犾犪狋狌狊 。 俗称：美国红鼓鱼、美国红鱼、红拟石首鱼、黑斑石首鱼等。 ３．２　分类位置 属鲈形目（Ｐｅｒｃｉｆｏｒｍｅｓ），石首鱼科（Ｓｃｉａｅｎｉｄａｅ），拟石首鱼属（ 犛犮犻犪犲狀狅狆狊 ）。 ４　形态构造特征 ４．１　外部特征 ４．１．１　外部形态 眼斑拟石首鱼体呈纺锤形，侧扁，背部微隆，以背鳍起点处最高，头中等。口端位，口裂较大，齿细小 较尖锐，排列紧密。鼻孔两对，后一对呈椭圆形略大。眼上侧位，后缘和口裂末端平齐，中等大小，分布 于头两侧。正形尾，在其生长过程中，尾部形态发生改变，仔稚鱼为圆形尾，幼鱼为截形，成鱼为新月形 尾。尾柄基部侧线上方有一个或多个大于眼径的黑斑。眼斑拟石首鱼外部形态见图１。 图１　眼斑拟石首鱼外部形态 ４．１．２　可数性状 眼斑拟石首鱼可数性状见表１。 １ 犌犅２１０４７—２００７ 表１　眼斑拟石首鱼形态可数性状 背鳍Ｄ 臀鳍Ａ 尾鳍Ｃ 胸鳍Ｐ 腹鳍Ｖ 侧线鳞式 第一鳃弓外耙数 ＩＸ～Ｘ Ｉ２１～２３Ｉ～８ １７ １５～１７ Ｉ～５ ４６～５１６／ ８ １１ ４．１．３　可量比例性状 对于全长２１．３１ｃｍ～７５．５ｃｍ、体重８５ｇ～３９００ｇ的个体，实测比例性状值见表２。 表２　眼斑拟石首鱼形态可量比例性状值（平均值±标准差） 全长／体长体长／体高全长／体高体长／头长头长／吻长头长／眼径体长／尾柄长尾柄长／ 尾柄高 １．１４±０．０１５４．２４±０．２４６４．８３±０．２３７３．６６±０．１８３３．５５±０．２５５６．６２±０．７６７４．２５±０．２１４２．８８±０．２ ２６ ４．２　内部特征 ４．２．１　脊椎骨 ２１枚。 ４．２．２　鳔 长袋形。鳔内壁光滑无隔，一室。 ５　年龄与生长 ５．１　年龄 年龄鉴定多为鳞片及耳石 ５．２　生长 在自然海域眼斑拟石首鱼最大叉长１４９．９ｃｍ，体重４２．７ｋｇ。前５年生长较快，以后生长速度缓 慢。同一海域环境，１龄～３龄平均生长情况在性别上无明显差异，而大龄鱼雌雄差异明显。 在自然海域眼斑拟石首鱼体长、体重生长方程见式（１）、式（２）： 犉犔 ＝９７９．８［１－ｅ －０．４１８（ 狋 ＋０．１４９） ］ …………………………（１） 犠 ＝１０６８４．４［１－ｅ －０．４１８（ 狋 ＋０．１４９） ］ ３．０２７５ …………………………（２） 　　式中： 犉犔 ———叉长，单位为毫米（ｍｍ）； 狋 ———生长时间，单位为年； 犠 ———体重，单位为克（ｇ）。 不同年龄组的眼斑拟石首鱼体长、体重实测值，见表３。 表３　池养眼斑拟石首鱼体长、体重实测值 年龄／龄 ０ １ ２ ３ 实测体长／ ｍｍ ３０．３０ ３１０．７０ ４７２．２０ ５５１．７０ 实测体重／ｇ ０．５２ ５３０．１７ １５８１．５７ ２４８６．４６ ５．３　体长和体重关系 眼斑拟石首鱼不同阶段体长和体重关系如下： ａ）　苗种阶段 犠 ＝０．０００７ 犅犔 ４．１９１３ ｂ）　未成熟鱼阶段 室内水泥池养殖： 犠 ＝０．０１２５ 犅犔 ３．０７７６ 海上网箱养殖： 犠 ＝０．０１６５ 犅犔 ３．１８５２ ２ 犌犅２１０４７—２００７ ｃ ） 　 亲鱼阶段 犠 ＝６．１６７３×１０ －６ 犉犔 ３．０９８４ 注 ： 犅犔 为标准体长 ， 单位为厘米 （ ｃｍ ）。 ６ 　 繁殖 ６ ． １ 　 性成熟年龄 眼斑拟石首鱼成熟的最早年龄 ： ♂ 性 １ 年 ， ♀ 性 ３ 年 。 眼斑拟石首鱼成熟的最晚年龄 ： ♂ 性 ５ 年 ， ♀ 性 ６ 年 。 ６ ． ２ 　 性成熟与体长 自然海区的雄性眼斑拟石首鱼体长达 ３５０ｍｍ 时性成熟 ， ５０％ 性成熟的雄性体长为 ５１１ｍｍ ～ ５２９ｍｍ 。 大多数雄性在 １ 龄或 ２ 龄时成熟 ， 到 ３ 龄时全部成熟 。 而雌性体长达 ５５０ｍｍ 后性成熟 ， ５０％ 性成熟的雌性体长为 ８２５ｍｍ ～ ９００ｍｍ 。 一些雌性 ３ 龄时成熟 ， ６ 龄时全部性成熟 。 ６ ． ３ 　 性成熟的极限值 成熟个体的平均最大叉长 ： 雄性 ８１０ｍｍ ， 雌性 ８１０ｍｍ ； 最大体重 ： 雄性 ５．４０ｋｇ ， 雌性 ６．１０ｋｇ ； 最 小叉长 ： 雄性 ５９３ｍｍ ， 雌性 ５９８ｍｍ ； 最小体重 ： 雄性 ２．３５ｋｇ ， 雌性 ３．４３ｋｇ 。 ６ ． ４ 　 产卵类型 性腺分批成熟 ， 多次产卵 。 采用光温人工控制 ， 在年周期内 ， 可多次成熟 、 增加产卵次数 。 卵子为浮 性卵 ， 卵径在 ０．８６ｍｍ ～ １．０８ｍｍ 。 ６ ． ５ 　 产卵量 眼斑拟石首鱼产卵量见表 ４ 。 表 ４ 　 眼斑拟石首鱼产卵量 年龄 ／ 龄 ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ 产卵量 ／ ×１０ ４ 粒 ５ ～ １０１２．５ ～ ２０３０ ～ ５０ ６０ ～ ７５８０ ～ １００１１０ ～ １５０１４０ ～ １８０ ６ ． ６ 　 产卵温度范围 亲鱼产卵季节的温度范围为 ２３℃ ～ ２８℃ ， 低于 ２１℃ 就会停止产卵 。 ７ 　 细胞遗传学特性 ７ ． １ 　 体细胞染色体数 ２ 狀 ＝４８ 。 ７ ． ２ 　 核型 核型公式为 ２ 狀 ＝４８ｔ ， 即 ２４ 对染色体均为端部着丝点染色体 ， 臂数 （ ＮＦ ） 为 ４８ 。 眼斑拟石首鱼核 型见图 ２ 。 图 ２ 　 眼斑拟石首鱼核型 ３ 犌犅 ２１０４７ — ２００７ ８ 　 生化遗传学特性 ８ ． １ 　 同工酶的谱型 肌肉组织同工酶的乙醇脱氢酶同工酶 （ ＡＤＨ ）、 ６ 磷酸葡萄糖异构酶同工酶 （ ＧＰＩ ）、 乳酸脱氢酶同工 酶 （ ＬＤＨ ）、 苹果酸酶同工酶 （ ＭＥ ） 的电泳图谱分别见图 ３ 、 图 ４ 、 图 ５ 、 图 ６ 。 图 ３ 　 乙醇脱氢酶 （ 犃犇犎 ） 图 ４ 　 ６  磷酸葡萄糖异构酶 （ 犌犘犐 ） 图 ５ 　 乳酸脱氢酶 （ 犔犇犎 ） 图 ６ 　 苹果酸酶 （ 犕犈 ） ８ ． ２ 　 群体遗传变异性 眼斑拟石首鱼 １４ 种同工酶共 ２４ 个基因座位 。 多态位点比例为 ２９．２％ ； 实际杂合度为 犎 ｏ ＝ ０．０５７ ， 平均预期杂合度 犎 ｅ ＝０．１０８ 。 ９ 　 检测方法 ９ ． １ 　 形态性状测定方法 按 ＧＢ ／ Ｔ１８６５４．３ 执行 。 ９ ． ２ 　 染色体组型分析 按 ＧＢ ／ Ｔ１８６５４．１２ 执行 。 ９ ． ３ 　 同工酶测定分析方法 将眼斑拟石首鱼活体样品运回实验室 ， 立即取其肌肉组织放入 ５ｍＬ 冷冻管 ， 置于 －２０℃ 冰箱保 存 ； 实验时从冰箱中取出冷冻管 ， 置于冰盒上稍微解冻 ， 然后用 １．５ｍｍ×８ｍｍ 的双层滤纸蘸取组织液 进行点样 。 淀粉采用 Ｓｉｇｍａ 公司生产的水解马铃薯淀粉 ， 凝胶浓度为 １２％ 。 缓冲液系统采用 ＴＣ７．０ 和 ＣＡＰＭ６．０ ， 在恒流 （ ３０ｍＡ ） 恒温 （ ４℃ ） 的条件下电泳 ４．５ｈ ～ ５．０ｈ ， 具体的电泳技术和染色方法及 酶的命名分别参照日本水产资源保护协会和 Ｓｈａｋｌｅｅ 方法 。 同工酶分析采用水平淀粉凝胶电泳技术 ， 对不少于 ３０ 条眼斑拟石首鱼进行了生化遗传分析 。 ４ 犌犅 ２１０４７ — ２００７ 同工酶染色液配方见表５。 表５　同工酶染色液配方 酶的种类 英文、缩写及Ｅ．Ｃ． 代码 药品 浓度 剂量 乙醇脱氢酶ａｌｃｏｈｏｌｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ＡＤＨ Ｅ．Ｃ．１．１．１．１乙醇（ｅｔｈａｎｏｌ） ９９％ １ｍＬ～ ２ｍＬ Ｔｒｉ